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一、使用前的技术准备
1. 上岗前的技术培训:SFM— 2000L等发酵罐是机电一体化的设备,因此;操作人员上岗前必须进行技术培训,使他们熟悉整个系统的工作原理、管路、阀门的操作程序,并对空压机,蒸汽锅炉、变频电机等设备,能正确操作使用。未经培训的人员,不得单独上岗操作。
2. 设备使用之前,应先检查电源是否正常,空压机、微机控制系统、循环水系统是否能正常工作。
3. 检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。
4. 开动空压机,用0.15Mpa压力,检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门的密封性能是否良好。
二、空消
在投料前,气路、料路、种子罐、发酵罐、碱罐、消泡罐必须用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态。
1. 空气管路的空消
(1) 空气管路上有三级预过滤器,冷干机和除菌过滤器。预过滤器和冷干机不能用蒸汽灭菌,因此在空气管路通蒸汽前,必须将通向预过滤器的阀门关闭,使蒸汽通过减压阀、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。
2. 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐空消
(1) 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消。
(2) 空消时,应将罐上的接种口,排气阀,及料路阀门微微打开,使蒸汽通过这些阀门排出,同时保持罐压为0.13~0.15Mpa。
(3) 空消时间为30~40分钟,特殊情况下,可采用间歇空消。
三、实消
实消是当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程,种子罐、碱罐、消泡罐和发酵罐实消的操作过程相同。
1. 空消结束后,应尽快将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水。
2. 培养基在进罐之前,应先糊化,一般培养基的配方量以罐体全容积的70%左右计算(泡沫多的培养基为65%左右,泡沫少的培养基可达75~80%),考虑到冷凝水和接种量因素,加水量为罐体全容积的50%左右,加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关,需在实践中摸索。
3. 先开启机械搅拌装置,使罐内物料均匀混合,转速50~100rpm。
四、种子罐接种、培养
1. 本设备采用火焰封口接种,接种前应事先准备好酒精棉花、钳子、镊子和接种环。
2. 菌种装入三角烧瓶内,接种量根据工艺要求确定。
3. 将酒精棉花围在接种口周围点燃,用钳子或铁棒拧开接种口,此时应向罐内通气,使接种口有空气排出。
五、移种
1. 本设备采用压差移种,即在种子罐压力大于发酵罐压力的条件下将种子转移到发酵罐内。
2. 发酵罐经实消冷却到接种温度后即可移种。
3. 移种前,对移种管路,阀门用蒸汽灭菌20分钟。
4. 移种时,种子罐保持0.08Mpa,发酵罐保持0.03Mpa,打开移种管路上的阀门,种子在压差作用下,由种子罐转入发酵罐。
六、发酵罐的培养
1. 种子接入发酵罐后,即可进行控温培养,罐压一般控制在0.05Mpa,转速根据各自工艺要求而定。
2. 发酵温度根据工艺要求而定,通过调节循环水的温度来控制发酵温度,当环境温度高于发酵温度时,用冷水降温。
3. 发酵液的PH值是根据工艺要求而定,当需要调整PH值时,逐步加入酸碱液,直至所需PH值。
4. 在发酵中途要取样检查时,可通过取样口取样。取样前,取样管路阀门需用蒸汽灭菌,防止杂菌污染而引起误导,取样结束后同样要用蒸汽冲洗取样管道阀门。
七、出料
1. 本设备的出料是利用罐压将发酵液从出料管道排出,根据发酵液的浓度,罐压可控制在0.05~0.1Mpa。
2. 出料后取出溶氧、PH仪,进行清洗保养。
八. 维修与保养
1. 安置设备的环境应整洁、干燥、通风良好,水、汽不得直接泼到电器上。
2. 设备启用之后,必须及时清洗,防止发酵液干结在发酵罐及管路、阀门内。
3. 各类仪表,应按规定要求保养存放 压力表、安全阀、温度仪每年应校准一次。
4. 设备停止使用时应清洗、吹干。过滤器的滤芯应取出清洗,凉干,妥善保管,法兰压紧螺母应松开,防止密封圈永久变形。
九. 特别注意事项
1. 在发酵过程中,严禁将过滤器的排水阀突然打开而引起发酵液倒流。
2. 当突然停电时,应迅速关闭发酵罐及空气系统进,排气阀,保持罐压和空气系统不造成负压。